English Українська
  • Головна
  • Корисні посилання
  • Про журнал
  • Авторам
  • Редакційна колегія

  • Стаття
    Є. В. Стецук, В. І. Шепітько, О. Є. Акімов, О. С. Якушко, Н. В. Соловьова

    ВПЛИВ КВЕРЦЕТИНУ НА БІОХІМІЧНІ ТА МОРФОЛОГІЧНІ ЗМІНИ В СІМ’ЯНИКАХ ЩУРІВ ПІСЛЯ 30-ДЕННОГО ЦЕНТРАЛЬНОГО ЗНИЖЕННЯ ЛЮТЕЇНІЗУЮЧОГО ГОРМОНУ


    Про автора: Є. В. Стецук, В. І. Шепітько, О. Є. Акімов, О. С. Якушко, Н. В. Соловьова
    Рубрика ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА
    Тип статті Наукова стаття
    Анотація При стресі різної етіології у щурів відзначаються порушення в гіпоталамо-гіпофізарної системі, що призводить до порушення вироблення рилізинг-факторів нейросекреторну клітинами гіпоталамуса, як наслідок, пригнічується вироблення гонадотропних гормонів передньою долею гіпофіза. Як відомо, тестостерон та фолікулостимулюючий гормон це два основних і незалежних регулятора сперматогенезу, так як ефекти кожного з них реалізуються на відповідних стадіях сперматогенного циклу. Ці факти вказують на необхідність вжиття заходів для з'ясування причин репродуктивних відхилень, вивчення механізмів і пошуку профілактичних засобів природного класу для корекції тестикулярной дисфункції різного генезу. Метою дослідження було вивчення мікроскопічної організації інтерстиційного простору сім'яників щурів, визначення джерел продукції оксиду азоту і інтенсивності окисного стресу в сім'яниках щурів під час експериментальної центральної депривації синтезу тестостерону шляхом ін'єкції триптореліну на 30-ту добу експерименту з введенням кверцитину. Експеримент виконаний на 20 зрілих самцях щурів. Щури були розділені на 2 групи по 10 тварин (контрольна та експериментальна). Центральна депривація синтезу тестостерону моделювалася ін'єкцією триптореліну в дозі 0,3 мг активної речовини / кг маси та введення кверцитину 100мг/кг, в той час як контрольна група отримувала ін'єкцію фізіологічного розчину. Використовуючи стандартні методи, матеріал заливали в парафінові блоки, з яких робили зрізи товщиною 4 мкм і фарбували гематоксиліном та еозином. Всі біохімічні дослідження проводились з використанням спектрофотометра Ulab 101 в 10 % гомогенаті. Так при дослідженні нами сім'яників щурів на 30 день експерименту було встановлено, що при підрахунку площі інтерстиціального простору до загальної площі тканини вона склала 17.4 %, в контролі 16.4 %, відносна кількість ендокріноцитів склала 6.2±0.45, середній діаметр цитоплазми інтерстиціальних ендокріноцітов 7.9±0.04 мкм, а діаметр ядра – 5.9±0.02 мкм. Ендокріноціти малих розмірів є малоактивними щодо стероїдогенезу і представляють собою інволюціонірует форми, в той час як клітини середнього і великого розміру є клітинами, що активно продукують стероїдні гормони, що можна простежити на типізації клітин в залежності від розташування до звивистих канальців в різні фази сперматогенезу. Відсоток кількості функціонально активних інтерстиціальних ендокриноцитів, до яких відносять клітини великого і середнього розміру, в контрольній групі тварин склав 65 %, а в експериментальній групі 54 %. Результати кількісного аналізу підтверджують морфологічні дані про те, що в сім'яниках інтактних щурів в популяції інтерстиціальних ендокріноцітов переважають активні щодо стероїдогенезу ендокріноціти, а в експериментальній групі, такий відсоток знижується на 11 % відповідно. В інтерстиції сім'яників чітко простежували дві популяції макрофагів за типом локалізації в сполучної тканини. Кількість макрофагів визначалося як 4-7 в полі зору в структурі «трикутника» интерстиції. Кверцетин частково запобігав розвитку окислювального пошкодження яєчок щурів через активацію антиоксидантного захисту та зменшення вироблення SAR. Однак, як видно з досить низького зниження концентрації MDA на тлі кількохкратного збільшення активності антиоксидантних ферментів, кверцетин має лише частковий вплив на окисно-відновний баланс у яєчках щурів на тлі введення дифереліну. Дослідження інших частин антиоксидантної системи або активних форм кисню необхідні для оцінки точного механізму цього впливу. Діяльність СОД, к.ю. Активність каталази, нкат/г тканини. Оскільки падіння активності cNOS може призвести до її роз’єднання з субстратом, що призведе до вироблення SAR з мікросомальних ETC. Крім того, одночасне перевиробництво SAR і оксиду азоту може призвести до утворення пероксинітриту, який є навіть більш потужним окислювачем, ніж SAR та оксид азоту. Активність аргінази знизилася на 87,10%. Аргіназа необхідна для відновлення та проліферації тканин, оскільки вона призводить до утворення L-орнітину, який трансформується орнітиндекарбоксилазою у путресцин. Зниження активності аргінази може бути результатом зниження рівня тестостерону, оскільки він діє як стимулятор аргіназ у яєчках. активність gNOS, мкмоль/хв на г білка iNOS активність, мкмоль/хв на г білка активність cNOS, мкмоль/хв на г білка Активність аргінази, мкмоль/хв на г протеїну NO2- концентрація, нмоль/л. Обробка піддослідних щурів кверцетином знизила активність gNOS на 56.67 %. Активність iNOS та cNOS також знизилася відповідно на 55.1 % та 67.27 %. Активність аргінази збільшилася на 225 %. Концентрація нітритів зросла на 54,04 %. Таке зниження виробництва оксиду азоту може мати суперечливий вплив на тканини яєчок щурів. Зниження активності iNOS може призвести до запобігання утворення пероксинітриту (разом із зменшенням вироблення SAR), але зниження активності cNOS може призвести до більш серйозного роз’єднання cNOS. Такі зміни активності cNOS можна пояснити збільшенням активності аргінази та посиленням конкуренції цих ферментів за L-аргінін. Ми можемо підозрювати розвиток дефіциту L-аргініну, викликаного дифереліном, але це твердження вимагає подальших досліджень. Збільшення концентрації нітритів у цьому випадку можна пояснити посиленням відновлення нітратів та нітритів як засобу синтезу оксиду азоту, незалежного від NOS.
    Ключові слова сімяники, інтерстиціальні ендокріноціти, макрофаги, кверцитин, NO-синтаза, iNOS, cNOS, L-аргінін, супероксиддисмутаза, щури
    Список цитованої літератури
    • Bahriy MM, Dibrova VA, Popadynets OH, Hryshchuk MI. Metodyky morfolohichnykh doslidzhen. Bahriy M.M., Dibrova V.A. redaktory. Vinnytsya: Nova knyha; 2016. 328s. [in Ukrainian].
    • Almeida S, Rato L, Sousa M, Alves MG, Oliveira PF. Fertility and Sperm Quality in the Aging Male. Curr Pharm Des. 2017; 23(30): 4429-4437. doi: 10.2174/1381612823666170503150313.
    • Atallah A, Mhaouty-Kodja S, Grange-Messent V. Chronic depletion of gonadal testosterone leads to blood-brain barrier dysfunction and inflammation in male mice. J Cereb Blood Flow Metab. 2017; 37(9): 3161-3175. doi: 10.1177/0271678 X16683961.
    • Botté MC, Lerrant Y, Lozach A, Bérault A, Counis R, Kottler ML. LH down-regulates gonadotropin-releasing hormone (GnRH) receptor, but not GnRH, mRNA levels in the rat testis. J Endocrinol. 1999; 162(3): 409-415. doi:10.1677/joe.0.1620409.
    • Gosálvez J, Coppola L, Fernández JL, López-Fernández C, Góngora A, Faundez R, et al. Multi-centre assessment of nitroblue tetrazolium reactivity in human semen as a potential marker of oxidative stress. Reprod Biomed Online. 2017; 34(5) :513-521. doi: 10.1016/j.rbmo.2017.01.014.
    • Hotta Y, Kataoka T, Kimura K. Testosterone Deficiency and Endothelial Dysfunction: Nitric Oxide, Asymmetric Dimethylarginine, and Endothelial Progenitor Cells. Sex Med Rev. 2019; 7(4): 661-668. doi: 10.1016/j.sxmr.2019.02.005.
    • Jovicić M, Pintus E, Fenclova T, Simonik O, Chmelikova E, Ros-Santaella JL, Sedmikova M. Effect of nitric oxide on boar sperm motility, membrane integrity, and acrosomal status during semen storage. Pol J Vet Sci. 2018; 21(1): 73-82. doi: 10.24425/119024.
    • Ji C, Xu Y, Han F, Sun D, Zhang H, Li X, Yao X et al. Quercetin alleviates thermal and cold hyperalgesia in a rat neuropathic pain model by inhibiting Toll-like receptor signaling. Biomed Pharmacother. 2017; 94: 652-658. doi: 10.1016/j.biopha.2017.07.145.
    • Liu FH, Yang DZ, Wang YF, Liang XP, Peng WM, Cao CA, Chen XG, Guo ZM. Making of the animal model with sterilized testes. Zhonghua Nan Ke Xue. 2007; 13(2): 125-9. [in Chinese]. PMID: 17345767
    • Merseburger AS, Hupe MC. An Update on Triptorelin: Current Thinking on Androgen Deprivation Therapy for Prostate Cancer. Adv Ther. 2016; 33(7): 1072-93. doi: 10.1007/s12325-016-0351-4.
    • Morris SM Jr. Arginine Metabolism Revisited. J Nutr. 2016 Dec;146(12):2579S-2586S. doi: 10.3945/jn.115.226621.
    • Mossadegh-Keller N, Sieweke MH. Testicular macrophages: Guardians of fertility. Cell Immunol. 2018; 330: 120-125. doi: 10.1016/j.cellimm.2018.03.009.
    • Rice MA, Malhotra SV, Stoyanova T. Second-Generation Antiandrogens: From Discovery to Standard of Care in Castration Resistant Prostate Cancer. Front Oncol. 2019; 9: 801. doi: 10.3389/fonc.2019.00801.
    • Scovell JM, Khera M. Testosterone Replacement Therapy Versus Clomiphene Citrate in the Young Hypogonadal Male. Eur Urol Focus. 2018; 4(3): 321-323. doi: 10.1016/j.euf.2018.07.033.
    • Stetsuk YeV, Kostenko VO, Shepitko VI, Goltsev AN. Influence of the 30-days central deprivation of testosterone synthesis on the morphological and functional features of rat testicular interstitial endocrinocytes and sustentocytes. World of Medicine and Biology. 2019; 4(70): 228-233. doi: 10.26724/2079-8334-2019-4-70-228-233.
    Публікація статті «Світ Медицини та Біології» №3(77), 2021 рік , 243-248 сторінки, код УДК 612.0616.31:599.323.7+ 577. 152.34
    DOI 10.26724/2079-8334-2021-3-77-243-248